《J Nanobiotechnology》：一种"会治病"的磷脂当载体，包住ERK抑制剂，口腔癌从源头掐断血管

《J Nanobiotechnology》：一种"会治病"的磷脂当载体，包住ERK抑制剂，口腔癌从源头掐断血管

◆ （模式一：小节标题叙述式）

口腔鳞状细胞癌（OSCC）占口腔与口咽恶性肿瘤的80%以上，5年生存率长期徘徊在低位。它的发生与槟榔、烟酒、HPV感染与慢性机械刺激密切相关；因舌、颊部位血供丰富、淋巴管网密集，确诊时往往已伴颈淋巴结微转移。更麻烦的是治疗窗口：手术切除加放化疗是标准路径，但术后复发与第二原发灶（"区域癌化"field cancerization）让长期生存难以兑现，于是靶向与化学预防成为新战场。分子层面，RAS–Raf–MEK–ERK（MAPK）通路在OSCC中异常激活——ERK1/2是该模块的钥匙激酶，驱动细胞周期、分化与存活基因的转录，也是克服上游（BRAF、MEK）抑制剂耐药的下游靶点。已上市的通路抑制剂不少（厄洛替尼、达拉非尼、维莫非尼、曲美替尼），但单用疗效平庸、起效慢。MK8353是口服强效选择性ERK1/2抑制剂，正在晚期/转移性实体瘤做早期临床，对鳞癌与结直肠癌显示"快起效"的良好潜力。可它有三个现实硬伤：高剂量口服带来视物模糊、视网膜脱离、黄斑水肿、呕吐腹泻与恶心，生物利用度还低。与此同时，抗血管生成是OSCC的另一条被看好的路线——VEGF通路是所有抗血管疗法的必经之地，而血管生成素相关蛋白2（Angptl2，肿瘤新生血管启动与维持因子、恶性生长早期标志物）在OSCC组织中同样高表达。但单靠抗血管生成疗效不持久、易产生获得性耐药与复发，业界共识（IQVIA《Global Oncology Trends 2023》）指向联合治疗。痛点汇总为一句话：两个好靶点，一个缺递送、一个缺持久。

图1 NP-AE制备与表征：粒径、TEM、电位、紫外、HPLC与释放曲线

◆ 设计思路：让"载体"本身成为第二味药

中山大学Zixian Huang/付明团队（联合华南师大）近日在 Journal of Nanobiotechnology（2025;23:585，DOI: 10.1186/s12951-025-03577-7）给出的解法极为轻巧：不再往脂质体上叠加功能分子，而是直接选用一味"本身就有药效"的磷脂——二棕榈酰磷脂酸（DPPA），一种天然阴离子磷脂，近年被发现具抗肿瘤血管生成活性，用它去包MK8353。这样纳米颗粒自己就是药：DPPA负责抗血管，MK8353负责阻ERK，双效合一。解释一句载体常识：磷脂酸是细胞膜磷脂代谢的中间物，DPPA因两条C16饱和酰链而在常温下有序成膜；用纳米沉淀法（把有机相缓慢滴入搅拌水相，溶剂扩散瞬间过饱和自组装）即可成粒，无需复杂设备与PEG化。

◆ 理化与释放：110 nm、包封率近59%、48小时缓释

DPPA:MK8353质量比10:1为最优条件：粒径110 nm、分布均一，TEM示规则球形，Zeta电位-38.5±10.6 mV（强负电利于胶体稳定），259 nm紫外吸收峰与HPLC图谱证实载药；荧光法与HPLC两种独立方法给出包封率58.8±3.4%与56.5±2.1%，彼此印证。释放曲线呈持续缓释，48小时释出70–80%——相对游离药"一波冲顶"的血药浓度，这是长效作用的基础。对照组PLGA-ERKi（常用可降解聚合物载体）同药同工艺，用于比较载体本身有无活性。

◆ 体外抗肿瘤：DPPA对口腔癌细胞无毒，但一装药IC50显著下移

先厘清一件事：DPPA单独120 µg/mL对SCC-7与CAL-27两种口腔癌细胞活性无影响——它的药效在血管，不在肿瘤细胞，毒性边界清晰。而MK8353裸药IC50在SCC-7为155 ng/mL、CAL-27为7.937 µg/mL，装进NP-AE后两株细胞的IC50显著低于裸药——颗粒更易被细胞吞噬，生物利用度改善。功能实验齐上：以裸药1/10 IC50剂量作用，24小时Annexin V-FITC/PI流式显示NP-AE总凋亡率约41%、显著高于裸药；Alamar Blue增殖曲线与14天结晶紫克隆形成实验均示NP-AE压制增殖与克隆力更强。 uptake与溶酶体逃逸也被确认：CAL-27（线粒体GFP标记）孵育NP-AE-Cy5后0.5–8小时共聚焦见红色荧光入胞并于8小时完成溶酶体逃逸。

图2 体外抗肿瘤与抗血管：凋亡、增殖、克隆、HUVEC成管

抗血管机制：蛋白组学锁定Angptl2，首次把磷脂与促血管因子连起来：30–240 µg/mL的NPs-DPPA对SCC-7/CAL-27中VEGFA、Angptl2、FGF2、PTGS2、PD-ECGF五个血管相关基因的mRNA水平毫无影响。于是转向蛋白层：4D Smart DIA（数据非依赖性采集平行分裂碎裂，timsTOF Pro平台）定量出7833种蛋白，DPPA组对照片段得451个差异蛋白（142升、309降），GO富集最强项之一恰是"内皮细胞增殖的负调控"；其中Angptl2显著下调，而VEGFA因检测深度未命中，改用Western blot验证——同样下降机制部分是本文的原创点。qPCR先排掉转录层作用，而MK8353裸药、PLGA-ERKi与PBS组毫无效果——抗成管的"功臣"是DPPA本身。NP-AE则同时抑制ERK磷酸化与Angptl2/VEGFA表达，双通路协同。

图3 NPs-DPPA经Angptl2抑血管：蛋白组热图、火山图、GO与免疫印迹

◆ 药代、分布与安全：8小时血药仍约20%，肝肾脾蓄积，脏器无损伤

健康小鼠静注后，NP-AE显示长循环特征——8小时仍可测得约20%的血液信号，作者归因于DPPA是生物活性脂质、无需PEG化即不触发宿主清除。原位舌癌模型（SCC-7荧光素酶标记）给NP-AE-Cy5后，瘤灶荧光显著高于游离MK8353-Cy5，离体组织匀浆检测一致；两者均以肾为主分布器官（小粒径+肾转运体主动摄取），并兼有肝蓄积。安全性：健康小鼠给MK8353或NP-AE后主要脏器HE形态无明显异常，血生化（ALT、AST、ALP、ALB、BUN、CREA）全部在正常范围。

图4 药代动力学、体内分布与生物安全性

◆ 两模型疗效：原位舌癌与患者PDX，四项指标齐降70%上下

疗效验证用了两个互补模型。其一，舌原位移植瘤：5×10⁵ SCC-7-Luci细胞种于BALB/c nude鼠舌缘，第7天IVIS见瘤发光后开始给药（游离药口服5 mg/kg，各类颗粒尾静脉1 mg/只、隔天共3次）。因舌癌影响进食导致体重下滑，NP-AE组体重下降显著慢于各组、瘤重最小；IVIS生物发光每5天追踪（第7/12/17/22天），第22天终点NP-AE的肿瘤辐射强度最低、瘤负荷削减最显著。免疫组化定量：CD31计微血管密度（MVD）降约72.7%、增殖标志Ki67⁺降约69.7%、Angptl2⁺降约70.6%、P-ERK⁺降62.3%——抗血管与通路抑制双双兑现。其二，患者来源移植瘤（PDX，OSCC患者组织块种于NSG鼠背侧，瘤约60 mm³起治）：三次给药后第8天起肿瘤生长显著受抑，NP-AE组瘤体积稳定维持20天，对照组同期陡增；瘤重最低，CD31/Ki67/Angptl2/P-ERK四项同样以NP-AE降幅最大，且不影响体重、生化与脏器病理正常——把"贴近患者异质性"的验证也补上了。

图5 舌原位移植瘤治疗：体重、瘤重、活体发光与终点影像

图7 OSCC患者PDX模型疗效：肿瘤照片、生长曲线与四项IHC定量

本研究首次用蛋白组学证明DPPA可通过抑制肿瘤细胞分泌Angptl2而抗血管生成，并据此构建了"载体即药物"的双效纳米平台NP-AE：110 nm、包封率近59%、48小时缓释，静脉给药长循环并富集瘤灶，在体外促凋亡抑增殖、破坏内皮成管，在体内外同时压低P-ERK与Angptl2/VEGFA，在原位与PDX两个OSCC模型中显著抑制肿瘤生长且未见毒性。其思路的可迁移性值得反复咀嚼：当一个递送材料与一个药物作用于同一疾病的两个互补通路时，"惰性载体"的执念可以被放弃——换成其他具固有药理活性的磷脂（如溶血磷脂酸、磷脂酰丝氨酸类）或其他小分子激酶抑制剂，同一纳米沉淀一步即可复刻；从口腔癌出发，同一逻辑有望平移到依赖新生血管的头颈肿瘤乃至癌前病变的化学预防。

◆ 关于纳米医学网（舜纳纳米）

本文的"生物活性磷脂纳米粒+小分子激酶抑制剂"体系，与纳米医学网（Sunlipo Biotech，www.med-nanotech.com）的日常服务高度对口：脂质体与LNP递送系统构建（功能磷脂筛选、纳米沉淀/薄膜水化工艺放大）、磷脂-PEG-靶分子偶联物（配体与探针修饰）、粒径电位/TEM/HPLC-ICP-MS表征检测，再到活体荧光成像与体内靶向分布检测、临床前药效与安全性评价，一站式覆盖"设计→制备→表征→动物验证"全链条，帮课题组把双效纳米药做出来、测明白。

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参考资料：https://doi.org/10.1186/s12951-025-03577-7
全文链接：https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC12273460/
声明：仅代表作者个人观点，用于研究用途，如有不科学之处，欢迎留言指正！

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