核酸适体合成
核酸适体合成
★服务概述
核酸适体（Aptamer）是经指数富集配体系统进化技术（SELEX）筛选获得、能特异性结合靶标（蛋白、细胞、小分子）的单链 DNA 或 RNA 寡核苷酸。相较抗体，适体分子量小、易化学合成与修饰、免疫原性低、批间一致性好，是纳米载体靶向修饰的理想识别元件。本服务提供适体筛选、合成与功能化修饰、亲和力与靶向特异性评价（限科研用途）。
★技术原理
适体通过折叠形成特定的三维结构，以氢键、静电、形状匹配等方式与靶标高亲和结合，其解离常数（Kd）通常可达纳摩尔甚至皮摩尔级。常用筛选策略包括蛋白 SELEX、Cell-SELEX（以完整细胞为靶标，无需预先知道靶标分子）等；筛选轮次中通过扩增与分离富集高亲和序列，最终经高通量测序获得候选适体。为进一步降低 Kd 与提高稳定性，可对适体进行截短、突变或化学修饰（如 2′-氟、2′-O-甲基、硫代磷酸酯骨架）。
★技术要点
- ◆筛选策略匹配：可溶靶标用 Protein-SELEX，细胞表面未知靶标用 Cell-SELEX，小分子靶标需固定化设计。
- ◆序列优化：截短最小结合域、引入化学修饰提高血清核酸酶稳定性。
- ◆末端修饰：5′/3′ 端可接生物素、巯基（-SH）、氨基（-NH₂）、荧光基团、叠氮等，便于偶联。
- ◆载体偶联：可与 DSPE-PEG-马来酰亚胺、链霉亲和素等体系配合完成脂质体/纳米粒表面修饰。
- ◆靶向与稳定平衡：兼顾靶向效率、修饰密度与体内半衰期。
★服务内容与流程
- 1.需求沟通（靶标类型、目标细胞/蛋白）
- 2.SELEX 筛选（蛋白或细胞）与高通量测序
- 3.候选适体序列合成与纯化（HPLC）
- 4.功能化修饰（生物素/巯基/氨基/荧光等）
- 5.亲和力测定（SPR/ITC/流式/凝胶迁移）
- 6.靶向特异性与细胞结合评价
- 7.适体—载体偶联与靶向验证（可按需）
★表征与测试指标
| 项目 | 典型指标 | 方法 |
|---|---|---|
| 序列纯度 | HPLC 纯度 ≥ 90%（可定制 ≥ 95%） | HPLC、PAGE |
| 分子量 | 质谱确认 | ESI-MS／MALDI-TOF |
| 亲和力 | Kd（nM~pM 级） | SPR、ITC、流式 |
| 特异性 | 结合靶标 vs 对照细胞/蛋白 | 流式、共聚焦 |
| 修饰效率 | 末端修饰率 | 质谱、HPLC |
★应用示例
- ◆肿瘤靶向：以细胞 SELEX 获得肿瘤细胞特异适体，修饰脂质体提高瘤内富集。
- ◆免疫调控：以 CD 分子适体修饰纳米载体，实现免疫细胞亚群靶向。
- ◆诊疗一体：荧光标记适体用于靶向成像与递送示踪。
★送样与交付
请提供靶标信息（蛋白序列/细胞系）；交付物包括适体序列、纯度与质谱报告、亲和力与特异性数据及实验报告。
★相关产品
可配套 DSPE-PEG-马来酰亚胺等功能化脂质材料，详见产品目录。
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